细胞培养
细胞培养技术是指将活体组织或细胞从试验动物体内取出,放在模拟体内生存环境的体外环境中(无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件),使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。
机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养;原代培养形成的单层细胞汇合以后,需要进行分离培养,此过程称为传代培养。
贴附型细胞主要分为以下几个类型:成纤维细胞型;上皮型细胞;多型细胞型、悬浮型等。
在细胞培养过程中,根据离体细胞的特点,提供满足其生长和发育的和培养条件:
1、必须保证在无菌条件下进行。
2、需要提供适宜的温度和CO2浓度。一般哺乳动物细胞培养的温度控制在37℃。CO2具有调节pH和缓冲的作用,一般提供5% CO2。
3、细胞离体培养技术的关键是细胞培养基。细胞培养基中含有细胞生长所需要的各种营养物质,如提供能量的物质(N源、C源)、代谢调节控制的物质(无机盐、维生素、激素)。培养基还需满足细胞培养所需要的pH、渗透压、调节物质等的全部需要。动物细胞最适宜pH一般在7.2~7.4,如果PH过低或过高,细胞将因为细胞膜受损而死亡。