细胞增殖的检测方法

MTT、CK8法：     技术原理：MTT商品名为噻唑蓝。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使MTT还原为蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。采用二甲基亚砜溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪在570 nm波长处测定其光吸收值，反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。    CCK8法原理是WST-8四唑盐能被活细胞内的脱氢酶还原成橙色甲臜染料，然后测定450 nm下的吸光值，生成的甲臜的量与活细胞数量成正比。

BrdU、EdU法：       技术原理：BrdU是一种胸腺嘧啶类似物，可以代替胸腺嘧啶插入复制的DNA双链中，这种置换可以稳定存在，并传递到子细胞中。细胞经固定和变性处理后，可以用免疫学方法检测DNA中的BrdU的含量，从而判断细胞的增殖能力。       EdU也是一种胸腺嘧啶类似物，能够在细胞增殖过程中代替胸腺嘧啶插入正在复制的DNA中。EdU与荧光染料可以特异性地反应检测DNA的复制。

免疫组化检测：       技术原理：使用免疫组化的方法对只表达在增殖细胞中相关抗原-Ki-67、PCNA进行检测。

细胞克隆形成：       技术原理：细胞克隆形成实验是用来检测细胞增殖能力、侵袭性、对杀伤因素敏感性等的重要技术。当单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，成为克隆。每个克隆含有50以上的细胞。细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。

碘化丙啶染色：      技术原理：细胞周期分为间期与分裂期两个阶段。间期又分为三期：即   G1 期 、 S 期 与 G2 期 。某些细胞在分裂结束后暂时离开细胞周期，停止细胞分裂( G0 期 )。由于细胞周期各时相的 DNA 含量不同，通常正常细胞的 G1 / G0 期具有二倍体细胞的 DNA 含量 ( 2N )，而 G2 / M 期具有四倍体细胞的 DNA 含量 (4N)，而 S 期的 DNA 含量介于二倍体和四倍体之间。PI可以与 DNA 结合，其荧光强度直接反映了细胞内 DNA含量。因此，通过流式细胞仪 PI 染色法对细胞内 DNA 含量进行检测时，可以将细胞周期各时相区分为 G1 / G0 期，S 期和 G2 / M期。