EMT
EMT,指上皮细胞-间充质转化的缩写,是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程。通过Western Blot的方法检测细胞中目的基因敲降或过表达后EMT marker蛋白表达量,可判断目的基因表达变化后是否能抑制EMT过程的发生,从而判断该基因是否为转移相关基因。
细胞迁移
细胞迁移是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一,是机体正常生长发育的生理过程,也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移。检测细胞迁移能力的实验包括划痕实验和Transwell实验。细胞划痕实验是,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,观察细胞。Transwell的基本原理是将transwell小室放入培养板中,小室内称为上室,培养板内称为下室,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,上室内添加上层培养液,下室内添加下层培养液。将细胞种在上室内,由于膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。
细胞侵袭
细胞侵袭实验的目的是研究趋化因子或其他营养物质对细胞侵袭的影响。将细胞种于上室,趋化因子等种于下室,细胞会向营养成分高的下室跑。与迁移实验不同是侵袭实验需要在小室聚碳酸酯膜上铺设一层基质胶。用以模仿体内细胞外基质,细胞欲进入下室,先要分泌基质金属蛋白酶(MMPs)将基质胶降解,方可通过聚碳酸酯膜。计数进入下室的细胞量可反映肿瘤细胞的侵袭能力。